首款！外泌体检测产品获批！

近日，由思路迪诊断研发推出的外泌体*巢癌检测试剂盒[注册名：人外泌体CA125、HE4、C5a检测试剂盒（化学发光法），商品名：泌思优TM]获中国国家药品监督管理局批准上市。

这是全球首款基于外泌体技术的*巢癌体外诊断产品，总体灵敏度超过95%。

从公开的数据得知，“泌思优TM”通过体外测定人血清外泌体中的CA125、HE4和C5a浓度（其中外泌体C5a为思路迪诊断依托外泌体技术原创的*巢癌生物标志物），并经给定的公式计算后得到受试者罹患上皮性*巢恶性肿瘤的评估分值(OCS)，适用于临床上发现有盆腔肿块的妇女患者，并为其肿块的良、恶性鉴别提供辅助诊断信息。

在四个临床中心先后开展的注册临床研究数据显示，产品在*巢癌诊断中总体敏感性为95.5%，在上皮性*巢癌和附件良性包块的鉴别诊断中特异性达到90.2%；在I期*巢癌中诊断的敏感性89.7%，整体性能上还是非常不错的。

****死亡率最高的妇科肿瘤

根据2022年国家癌症中心发布的最新肿瘤数据显示，我国*巢癌患者每年新发病例数为5.72万，死亡病例数为2.72万，且发病率呈逐年上升趋势。*巢癌早期诊断困难，一旦确诊多为晚期，让多数患者错过了最佳治疗时期，是死亡率最高的妇科肿瘤。从癌种的范围和市场容量来看，该产品比较适合走高收费精准检测的途径，因为从发病率来看，**癌虽然致死率高，但是新发病人数比较少，得找到这部分目标人群的待检人群（盆腔有肿块的妇女患者）。从发病率来看，做普筛阳性率可能会有点低，所以走精准检测的路子会快些。

基于外泌体的检测技术正盛

外泌体检测技术是液体活检中的一类，液体活检是以血液等体液为标本进行取样和分析的体外诊断技术，通过检测肿瘤释放到血液中的循环肿瘤细胞(CTCs)、循环肿瘤DNA(ctDNA)、细胞外囊泡（EVs，主要指外泌体）和循环无细胞RNA（cfRNA）这四种主要标志物的数量，进行肿瘤筛查及辅助治疗。

2019年3月，Pierre Arsène在英国成立了Mursla公司，致力于利用外泌体生物学提供下一代多组学液体活检解决方案。

2022年，Mursla获得罗氏诊断有限公司的指导，通过 MedCity 的“合作创新：伦敦诊断”计划，开展了一项用于肝癌监测的新型液体活检前瞻性试点研究。

外泌体靶标及检测技术

外泌体携带大量特异性蛋白质、脂质、核酸和代谢物等

1.蛋白质类标志物

外泌体蛋白质水平的分析技术主要有蛋白免疫印迹、ELISA、纳米流式细胞术、免疫电镜、串联质谱法等，其中免疫印迹法和ELISA最为常用，但许多低丰度的蛋白质无法检出。质谱分析逐渐成为外泌体蛋白质组学检测的重要技术。研究表明外泌体蛋白可作为疾病诊断及预后的潜在生物标志物。

2.脂质类标志物

外泌体脂质检测方法以质谱分析为主。Skotland等采用高通量质谱定量分析方法发现前列腺癌患者尿液外泌体中有9种脂质的表达水平显著升高，其中磷脂酰丝氨酸和乳糖基神经酰胺检测的敏感性为93%，特异性为100%。

3.代谢物标志物

外泌体中小分子代谢物逐渐被关注。研究者通过靶向超高效液相色谱-串联质谱技术发现尿液外泌体中葡萄糖醛酸、D-核糖-5-磷酸和异丁酰基-L-肉碱等代谢指标对前列腺癌的诊断及预后具有一定指导作用。

4.核酸类标志物

外泌体标志物研究主要集中于非编码RNA，相关技术包括高通量的基因芯片和二代测序技术，可实现外泌体非编码RNA表达谱分析，大力推动了低丰度LncRNA和circRNA的研究。

4.1 qRT-PCR技术

该技术广泛应用于外泌体RNA的检测。Ji等采用qRT-PCR技术筛选出的血清外泌体miR-374a-5p可作为高灵敏度、高稳定性的早期胃癌诊断标志物，ROC曲线下面积为0.919。

4.2 数字PCR

该技术是一种核酸分子绝对定量技术，无需标准曲线，对LncRNA和circRNA也能实现高精度的靶标定量，有效弥补qRT-PCR技术灵敏度不够、步骤繁琐及假阳性率高等问题(表2)。

核酸分子分析新技术

4.3 目前正在逐步开发应用更灵敏的自动化外泌体核酸分析技术

He等基于全内反射荧光成像原理开发了一种单囊泡成像分析方法，该法将分裂式DNA酶和荧光淬灭底物共同包装至外泌体，产生靶向miRNA的催化裂解反应和放大的荧光信号，从而直接观察血清外泌体并对其包裹的miRNA进行原位定量和分析。Wu等根据表面等离子体共振成像(SPRi)原理设计出一种新型生物传感器，通过Au-on-Ag异质结构和新型DNA纳米材料之间的协同作用超灵敏地检测出非小细胞肺癌相关外泌体miRNA，可用于早期诊断。Yang等将等离子体共振瑞利散射光谱法和暗场显微镜融合，开发了一款新型集成微流控装置，能从非小细胞肺癌患者尿液中分离并检测相关外泌体，发现早期肺癌患者。